Lipidómica do plama materno para o diagnóstico de diabetes gestacional e trissomia 21

Abstract

Devido à elevada incidência das doenças pré-natais, as complicações que podem causar tanto a mãe como ao feto e a necessidade da recorrência a métodos invasivos (amniocentese, amostragem das vilosidades coriónicas) para o diagnóstico, é de extrema importância desenvolver métodos de diagnósticos pré-natais não invasivos com maior sensitividade que possam permitir, de forma rápida, o rastreio ou diagnóstico precoce e garantir o bem-estar da mãe e do feto. Os lípidos encontram-se associados ao desenvolvimento de várias patologias da gravidez, nomeadamente a diabetes gestacional, anomalias cromossómicas, malformações fetais, entre outros. A lipidómica, que se debruça sobre o estudo dos lípidos, constitui uma ferramenta analítica muito útil para a pesquisa de biomarcadores que possam ser indicadores de certas patologias. Assim, o objetivo deste trabalho foi investigar possíveis marcadores lipídicos presentes no plasma materno que possam ser indicativos de diabetes gestacional e trissomia 21. Numa primeira etapa foi feita a extração de amostras de plasma de mulheres saudáveis, utilizando cinco métodos de extração distintos, com o objetivo de escolher o melhor método, em termos de eficácia e reprodutibilidade, utilizando a espetroscopia de RMN. Numa segunda etapa, após a escolha do melhor método de extração, amostras de mulheres grávidas saudáveis, diagnosticadas com diabetes mellitus gestacional e com fetos afetados pela trissomia 21, no 1º e 2º trimestre de gravidez foram analisadas, utilizando ferramentas bioinformáticas (análise multivariada: PCA e PLS-DA), com o objetivo de estudar alterações na composição lipídica do plasma entre controlos e doenças. Os resultados revelaram que existem diferenças nos níveis lipídicos plasmáticos entre mulheres grávidas com diabetes mellitus gestacional e mulheres grávidas saudáveis, existindo uma maior variação nos glicerídeos. A análise da trissomia 21 revelou que mulheres com fetos afetados por trissomia 21 possuem níveis diminuídos de fosfolípidos, tanto no 1º como no 2º trimestre, em relação aos controlos.

Due to high incidence of prenatal diseases and complications that they can cause to both the mother and the fetus, it is extremely important to develop efficient methods for non-invasive prenatal diagnosis that may allow screening /early diagnosis and ensure the well-being of mother and fetus. The lipids are associated with the development of various pregnancy diseases such as diabetes mellitus, chromosomal abnormalities, fetal malformations among others. The lipidomics, which focuses on the study of lipids, is a very useful analytical tool for the detection of biomarkers that may be indicators of certain diseases. The objective of this study was to investigate possible lipid markers present in maternal plasma that may be indicative of gestational diabetes and trisomy 21. In the first stage of this work, the extraction of samples from healthy women using 5 methods of lipids extraction was carried in order to choose the best method, using NMR spectroscopy. In the second stage, after choosing the best method of extraction, samples from healthy pregnant women diagnosed with gestational diabetes mellitus and with fetuses affected by trisomy 21 (1st and 2nd trimester) of pregnancy were analyzed using bioinformatics tools (multivariate analysis: PCA and PLS-DA) to study changes in the lipid composition of the plasma between controls and disease. The findings revealed that there are differences in plasma lipid levels among pregnant women with gestational diabetes mellitus and healthy pregnant women with greater variation in the resonance of the glycerides. The analysis of trisomy 21 revealed that women with fetuses affected by trisomy 21 have decreased levels of phospholipids in both 1st and 2nd trimesters compared to controls.