Influence of the nir operon in the adaptation of Staphylococcus aureus to the host environment

Abstract

Staphylococcus aureus is an opportunistic human pathogen, that commensally colonizes the human host and can cause a great number of severe diseases, that can be life-threatening. It is capable of infecting a wide range of tissues, from superficial skin to deeper tissues such as the gastrointestinal track, heart and bones. This variety of tissues show different oxygen concentrations, from highly oxygenated, like blood, to almost anaerobic environments, like the intestines. Little is known of the role played by genes involved in nitrite reduction (NirBD) and siroheme biosynthesis (sirABC) in the adaptation of S. aureus to less oxygenated environments and so it is important to study these genes and the response of this bacteria to the diverse environments found during the host infection. In this work, through qRT-PCR, we observed that oxygen rich environments inhibited the expression of nirR, nirB, sirA and sirC. Hypoxia leads to the onset expression, culminating in higher levels of expression under anaerobic conditions. In anaerobic conditions, nitrates showed to decrease the expression of the nir operon genes and sirC, but their presence also presence improved growth. The mutations ΔnirB, ΔnirD and ΔnirR weaken S. aureus growth, preventing the reduction of nitrites. The deletion of sirC also demonstrated effects, but since the process that is catabolized by this enzyme can occur naturally, but at a lower rate, the effects observed by the deletion of this gene resulted in slightly slower growth and consumption of nitrites, when compared to the wild-type. In summary, S. aureus shows resilience, adapting and surviving, different oxygen environments. It was also showed that the presence of nitrates and oxygen are inhibitors of the expression of the nir and sirC operon genes, in which sirC has been shown to be an enzyme-encoding gene, that when deleted did not impair nitrite reduction by S. aureus.

Staphylococcus aureus é patógeno oportunista do ser humano, que coloniza o seu hospedeiro comensalmente, tendo a capacidade de causar diversas doenças, que podem tornar-se mortais. É capaz de infetar uma grande panóplia de tecidos, desde altamente oxigenados, como o sangue, a quase anaeróbicos, como o intestino. Pouco se sabe relativamente ao papel de genes envolvidos na redução de nitritos (NirBD) e síntese de sirohemo (sirABC) na adaptação de S. aureus a ambientes menos oxigenados, sendo por isso importante estudar estes genes e a resposta da bactéria aos diversos ambientes encontrados aquando a infeção do hospedeiro. Neste trabalho, observou-se através de qRT-PCR que ambientes ricos em oxigénio inibem a expressão de nirR, nirB, sirA e sirC. A hipóxia leva ao inicio de expressão destes genes, culminando em superiores níveis de expressão em condições de anaerobiose. Em condições de anaerobiose, nitratos inibem a transcrição de genes do operão nir e sirC, mas a sua presença levou a um maior crescimentos. As mutações ΔnirB, ΔnirD e ΔnirR são debilitadores do crescimento de S. aureus, impedindo a redução de nitritos de uma forma completa. A deleção de sirC, o que resultou num crescimento e redução de nitritos semelhante ao do WT. Em suma, S.aureus, demonstra uma incrível resiliência, adaptandose e sobrevivendo a variadas concentrações de oxigênio. A presença de nitratos e oxigénio são inibidores da expressão dos genes do operão nir e sirC, no qual sirC demonstrou ser um gene que codifica uma enzima que quando deletado não impede a redução de nitritos por parte de S. aureus.