Ação reguladora das células mesenquimais do estroma nas células NK em artrite reumatóide

Abstract

O conhecimento crescente sobre a biologia das Células Mesenquimais do Estroma (MSCs) tem proporcionado o desenvolvimento de novas terapias celulares, especialmente na área reumatológica de etiologia auto-imune. Estas células exibem propriedades imunossupressoras, tendo a capacidade de suprimir a inflamação local e o dano do tecido numa grande variedade de doenças, em particular na Artrite Reumatóide (AR). O objetivo do estudo foi analisar a ação imunomoduladora das MSCs derivadas da medula óssea na capacidade de produção de citocinas inflamatórias pelas células NK do sangue periférico em doentes com AR e comparar com os resultados obtidos nas mesmas células de indivíduos saudáveis. O estudo envolveu amostras de sangue periférico de oito controlos e de doze doentes com AR. Para determinar a frequência de células NK a expressar TNFα e IFNγ por citometria de fluxo, realizaram-se co-culturas com células mononucleares do sangue periférico e MSCs, com posterior ativação in vitro com PMA e Ionomicina. Na presença de MSCs observou-se, em ambos os grupos em estudo, uma diminuição estatisticamente significativa na percentagem de células NK a produzir TNFα e IFNγ, bem como na expressão destas proteínas por célula. Observou-se também uma correlação negativa entre a percentagem de inibição relativa à expressão de TNFα ou IFNγ nas células NK e o índice DAS da AR. As MSCs inibem de forma eficiente a capacidade de produção de citocinas, nomeadamente TNFα e IFNγ pelas células NK, podendo desta forma contribuir para uma diminuição da inflamação e dos sintomas na AR.

The increasing knowledge about Mesenchymal Stromal Cells (MSCs) biology has provided the development of new cell therapies, particularly in Rheumatology area of auto-immune etiology. These cells exhibit immunosuppressive properties, having the ability to suppress local inflammation and tissue damage, in a wide variety of diseases, in particular, Rheumatoid Arthritis (AR). The objective of the study was to analyse the immunomodulatory action of bone marrow derived MSCs, in the ability of peripheral blood NK cells from patients with AR to produce inflammatory cytokines and compare the obtained results with those obtained from healthy individuals. Twelve patients with AR and eight controls were enrolled in this study. We performed co-cultures with peripheral blood mononuclear cells and MSCs during 24 hours. After this period mononuclear cells were activated in vitro with PMA and Ionomycin in order to determine the frequency of NK cells producing TNFα or IFNγ, by flow cytometry. In the presence of MSCs, it was observed, in both studied groups, a statistically significant decrease in the frequency of NK cells producing TNFα or IFNγ, as well as in the expression of both proteins at single cell level. It was also noticeable a negative correlation between the relative percentage of inhibition of TNFα or IFNγ expression in NK cells and the DAS index. MSCs inhibit, in an efficient way, the ability of cytokine production, namely TNFα and IFNγ by NK cells, and therefore contributing to the decrease of inflammation and AR symptoms.