iNKT cells in mucopolysaccharidosis type II patients

Abstract

A Mucopolissacaridose tipo II (MPS II) é uma Doença de Sobrecarga Lisossomal (LSD) pertencente às mucopolissacaridoses. É caracterizada pela acumulação de sulfato de heparan e dermatan devido à deficiência na enzima lisossomal Iduronato 2-Sulfatase. O lisossoma é um compartimento importante para a atividade dos linfócitos iNKT (iNKT). Os linfócitos iNKT são linfócitos T restritos a lípidos envolvidos na infeção, autoimunidade e vigilância tumoral. Estudos anteriores em modelos de murganhos de LSDs demonstraram uma redução do número de linfócitos iNKT assim como alterações nas subpopulações de linfócitos iNKT. Apesar destes resultados, investigação similar em doentes humanos foi ainda pouco abordada. Aqui, analisamos pela primeira vez os linfócitos iNKT de doentes com MPS II. Os dados foram recolhidos através da análise por citometria de fluxo de Células Mononucleares do Sangue Periférico de doentes com MPS II. Os doentes com MPS II não apresentavam diferenças nos linfócitos iNKT totais nem nas subpopulações de linfócitos iNKT. Fenotipicamente, não foram encontradas, nestas células, alterações na expressão de marcadores de ativação e de linfócitos NK. Uma vez que a ativação de linfócitos iNKT requer o funcionamento do lisossoma das células apresentadoras de antigénios, analisámos as suas frequências e fenótipos. Foram encontradas reduções significativas nos monócitos de doentes e não foram encontradas alterações nas restantes células. Não foram encontradas alterações fenotípicas nas células apresentadoras de antigénios. A comparação dos resultados apresentados nesta tese com os resultados previamente obtidos no nosso laboratório para outras LSD sugere que o desenvolvimento dos linfócitos iNKT é influenciado pela natureza das moléculas acumuladas. Descrevemos ainda pela primeira vez alterações na percentagem de monócitos no sangue de doentes com MPS II.

Mucopolysaccharidosis type II (MPS II) is a Lysosomal Storage Disorder (LSD) belonging to the group of mucopolysaccharidoses. It is characterised by the accumulation of heparan and dermatan sulfate due to deficiency of the lysosomal enzyme Iduronate 2-Sulfatase. The lysosome is an important compartment for the activity of invariant Natural Killer T cells (iNKT). iNKT cells are lipid-specific T cells that were shown to be important in infection, autoimmunity and tumour surveillance. Previous studies in mouse models of LSDs have shown a decrease in iNKT cell numbers and alterations in iNKT cell subsets. In spite of these findings, similar research in human patients has been poorly addressed. Herein, we analysed for the first time iNKT cells from Mucopolysaccharidosis type II patients. Data was acquired through flow cytometry analysis of Peripheral Blood Mononuclear Cells from MPS II patients. MPS II patients did not present differences in total iNKT cells neither in iNKT cell subsets. Phenotypically, no differences have been found in the expression of activation and NK cells markers. Since iNKT cell activation requires a functioning lysosome of antigen presenting cells, we analysed their frequency and phenotype. We have found a significant reduction in monocytes from patients and no differences in the other cells. Furthermore, no phenotypical alterations have been found in antigen presenting cells. The comparison of the results presented in this thesis with the results previously obtained by our laboratory in other LSD suggests that iNKT cell development is influenced by the nature of the accumulated molecules. We also described for the first time alterations in the percentage of monocytes in the peripheral blood of MPS II patients.