Estudo de uma mutação no gene gyrB de Pseudomonas aeruginosa

Abstract

Com o intuito de aprendizagem e aplicação de algumas técnicas de biologia molecular que possam representar uma mais valia no desempenho de funções no ambiente hospitalar, o trabalho prático realizado foi adaptado e enquadrado no contexto de um estudo já iniciado. Num trabalho anterior (Ferreira S. 2005), foi encontrada uma nova mutação no codão 464 do gene gyrB, que conduzia à substituição de um amino ácido serina por uma tirosina numa estirpe hospitalar de Pseudomonas aeruginosa (Pa30) resistente às quinolonas. P. aeruginosa é um importante patogénico oportunista que está associado principalmente, a infecções nosocomiais. Duas das suas principais características são a sua elevada resistência intrínseca e a sua virulência. O aumento de estirpes de P. aeruginosa resistentes às quinolonas tem servido de base para vários estudos. Neste contexto, pretendeu-se verificar se a mutação encontrada, estaria implicada na resistência às quinolonas na estirpe Pa30 . Esta mutação já tinha sido descrita em outras espécies bacterianas mas não em P. aeruginosa. O estudo consistiu na introdução do gene contendo a mutação descrita numa estirpe de E. coli sensível às quinolonas e posterior confirmação de aquisição de resistência pela célula sensível. Os resultados obtidos mostraram que a mutação descrita por Ferreira S. (2005) não é por si só, responsável pela resistência da estirpe às quinolonas, sugerindo que outros mecanismos possam estar activos.

ABSTRACT: With the aim of learning and get familiar with various molecular biology techniques the present work was adapted to that end. The techniques were adapted and applied to a study that was already initiated. Previously (Ferreira S. 2005), found a new mutation in codon 464 of the gyrB gene, that leads to an aminoacid substituition (serine to tyrosin) in an quinolone resistant hospital isolate of Pseudomonas aeruginosa (Pa30). P. aeruginosa is an important pathogen that is associated with a various nosocomial infections. Two of its most important characteristics are the intrinsic resistance to antibiotics and also its virulence. The preocupant increasing number of quinolone resistant strains constitutes the basis for several studies. In this context, the aim of the present work was to verify if the mutation found in the strain P. aeruginosa Pa30 has any implication in the resistance to quinolones. This mutation was found in other species, but not in P. aeruginosa. The study consisted in the introduction of the gyrB gene in na E. coli strain sensitive to the quinolones. Finally, resistance profile to quinolones was evaluated in the receptor strain. Results showed that the mutation previouly described is not, by itself, responsible for the resistance profile observed in P. aeruginosa Pa30 suggesting that other mechanisms might also be implied.