Caracterização genética de Giardia lamblia de origem humana e animal em Portugal

Abstract

Giardia lamblia é um organismo protozoário capaz de infectar o tracto intestinal de diversas espécies de animais onde se incluem os mamíferos. A heterogeneidade genética de G. lamblia está devidamente comprovada mas o seu potencial zoonótico continua ainda por esclarecer. Neste trabalho, analisaram-se 68 amostras de DNA obtidas a partir de fezes de origem humana e canina, com o objectivo de identificar os assemblages/genótipos que circulam no nosso país. Os resultados obtidos mostraram que os isolados humanos correspondiam aos assemblages A ou B, enquanto que os isolados caninos pertenciam aos assemblages A, C ou D, tendo por base o estudo do locus do gene da β-giardina pelas técnicas de PCR-RFLP e sequenciação de DNA. As prevalências dos diferentes assemblages nas amostras humanas foram de 94,1 % (32/34) para o assemblage A e de 5,9 % (2/34) para o assemblage B, enquanto que nas amostras caninas foram de 67,7 % (21/31) para o assemblage A, 6,5 % (2/31) para o assemblage C e de 6,5 % (2/31) para o assemblage D. Foram ainda identificadas 2 amostras caninas coinfectadas com os assemblages A e C (6,5 %) e 4 amostras caninas coinfectadas com os assemblages A e D (12,9 %). De realçar a identificação de um isolado A2, normalmente associado aos humanos, numa amostra de origem canina. A análise filogenética revelou que os isolados do assemblage A provenientes de humanos e animais eram idênticos entre si. Estes dados sugerem que os cães podem desempenhar um papel importante em ciclos zoonóticos de transmissão do parasita.

ABSTRACT: Giardia lamblia is a protozoan organism that can infect the intestinal tract of many animal species including mammals. Genetic heterogeneity of G. lamblia is well described but the zoonotic potential is still unclear. In this study, we analysed 68 DNA samples isolated from human and canine stool specimens, to get more insight in the different G. lamblia assemblages/genotypes present in our country. Results showed that the human isolates were divided into two main assemblages, A and B, while the canine isolates belonged to the assemblages A, C and D, on the basis of PCR-RFLP assays and DNA sequence analysis of the β-giardin gene. The prevalence of the different assemblages in the human samples was 94.1 % (32/34) for the assemblage A and 5.9 % (2/34) for the assemblage B, while in the canine samples was 67.7 % (21/31) for the assemblage A, 6.5 % (2/31) for the assemblage C and 6.5 % (2/31) for the assemblage D. We also identified 2 co-infections including the assemblages A and C (6.5 %) and 4 co-infections including the assemblages A and D (12.9 %) in dogs. An interesting finding was the identification of an A2 genotype, traditionally linked to human G. lamblia infections, in a dog sample. Phylogenetic analysis revealed a close relationship between human and animal assemblage A isolates. These findings suggest that dogs may play an important role in zoonotic transmission cycles of the parasite.