HLA and hemochromatosis disease association in São Miguel Island

Abstract

A hemocromatose hereditária uma doença autossómica recessiva do metabolismo do ferro, geralmente associada à mutação C282Y no gene HFE. Presume-se que a origem desta mutação tenha ocorrido por acaso no haplótipo HLA-A*03-B*07 de um indivíduo do noroeste da Europa. O presente trabalho visou caracterizar a associação entre os alelos e haplótipos dos loci HLA-A e -B com a mutação C282Y na população da ilha de São Miguel (Açores). Este estudo englobou 130 indivíduos, negativos para as mutações HFE H63D e S65C, que foram classificados em dois grupos: grupo C282Y (48 homozigóticos ou portadores da C282Y) e grupo controlo (82 dadores de sangue sem as três mutações no gene HFE). Para todos os indivíduos, foi efectuado a genotipagem HLA-A e -B por PCR-SSP e a detecção das mutações HFE por PCR-RFLP. A análise estatística revelou que quatro alelos – A*03 (p=0.003, OR=3.33), A*26 (p=0.003, OR=8.38), A*29 (p<0.001, OR=19.18) e B*45 (p=0.003, OR=8.37) – encontram-se significativamente aumentados no grupo C282Y. Os resultados demonstram, igualmente, uma associação significativa com a mutação C282Y para o haplótipo ancestral HLA-A*03-B*07 (p=0.006, OR=8.96) e dois haplótipos não ancestrais: A*02-B*58 (p<0.001, OR=19.78) e A*29-B*45 (p<0.001, OR=27.57). Além disso, outro haplótipo A*24-B*15 foi detectado por inferência directa num doente homozigótico para o HLA-A-B e para a mutação C282Y. Provavelmente, o mecanismo genético de recombinação gerou esta diversidade de haplótipos; no entanto, não se pode excluir a hipótese de uma mutação C282Y de novo no gene HFE associada ao haplótipo HLA-A*24-B*15. Em conclusão, além do haplótipo ancestral A*03-B*07, três novos haplótipos – A*02-B*58, A*24-B*15 e A*29-B*45 – sugerem estar associados à mutação C282Y na população da ilha de São Miguel. A elevada diversidade genética observada na população açoriana pode explicar a associação entre a mutação C282Y e os haplótipos HLA.

Hereditary hemochromatosis is an autosomal recessive disease of the iron metabolism, where HFE C282Y is commonly implicated. This mutation seems to have originated by chance on the HLA-A*03-B*07 haplotype in a northwestern European individual, and spread by migration. Given that recombination generates new haplotypes, the present investigation aimed to characterize the chromosomal background of C282Y in the São Miguel Island population (Azores). This study comprises 130 individuals, all negative for H63D and S65C, which were classified into two groups: 48 homozygous or carriers for C282Y, and 82 healthy individuals without these mutations. The subjects were HLA-A and -B genotyped by PCR-SSP, and HFE mutation detection was performed by PCR-RFLP. Statistical analysis revealed that four alleles – A*03 (p=0.003, OR=3.33), A*26 (p=0.003, OR=8.38), A*29 (p<0.001, OR=19.18) and B*45 (p=0.003 OR=8.37) – and the A*03-B*07 haplotype (p=0.006, OR=8.96) were significantly increased in the C282Y group. Two non-ancestral haplotypes were also significantly associated with C282Y: A*02-B*58 (p<0.001, OR=19.78) and A*29-B*45 (p<0.001, OR=27.57). This last haplotype showed the strongest association to the mutation in study, suggesting that it may be the principal hemochromatosis-haplotype in São Miguel Island population. Another haplotype – A*24-B*15 – was detected by direct inference in a C282Y and HLA-A-B homozygous patient. Recombination most probably generated these haplotypes, before or after the island settlement. However, we can not exclude the hypothesis of a recent de novo HFE C282Y mutation on the A*24-B*15 haplotype in an individual living in the São Miguel Island. Overall, in this population, besides the ancestral A*03-B*07, three new non-ancestral haplotypes – A*02-B*58, A*24-B*15 and A*29-B*45 – appear to be associated with C282Y. The association between this recessive mutation and these haplotypes undoubtedly reflects the high genetic diversity observed in the Azoreans.