Establishment of direct bladder cancer xenografts in nude mice

Abstract

A cistectomia radical e o tratamento standard do carcinoma urotelial invasivo da bexiga, contudo, cerca de metade dos paciente apresentam recidivas ap os a cirurgia e necessidade de quimioterapia sist emica. Pacientes com tumores invasivos da bexiga com caracter sticas id^enticas apresentam varia c~oes signi cativas na evolu c~ao natural da doen ca e resposta ao tratamento, re ectindo a composi c~ao heterog enea do tumor e a necessidade de uma tratamento personalizado. A avalia c~ao pr evia da sensibilidade do tumor a quimioterapia e especialmente importante e justi c avel em pacientes com elevado risco de apresentar resist^encia ao tratamento. Neste projecto, este risco e avaliado atrav es da an alise da express~ao de marcadores moleculares tais como o CD147, previamente associado a mau progn ostico e resist^encia a cisplatina. O principal objectivo deste projecto era estabelecer um modelo directo de carcinoma urotelial invasivo da bexiga humano atrav es de xenotransplante em ratinhos imunode cientes, caracterizar o modelo e avaliar a sua viabilidade como plataforma para o estudo da sensibilidade e resist^ encia dos tumores a quimioterapia. Um dos 9 fragmentos transplantados cresceu como implante prim ario nos ratinhos, tendo sido transferido com sucesso para novos animais, onde desenvolveu tumor em 2 dos 3 animais transplantados. A an alise histol ogica e immuno-histoqu mica (CD147, p53, p63, ki-67 e CK20) do xenotransplante, mostrou haver preserva c~ao da morfologia e fen otipo do tumor prim ario, pelo menos durante o estabelecimento do xenotransplante. Estes resultados preliminares suportam o valor deste modelo para ensaios com f armacos, por em, s~ao necess arios estudos adicionais para validar o modelo e determinar o per l dos pacientes que podem bene- ciar desta abordagem.

Radical cystectomy is a standard treatment for invasive bladder cancer, however, approximately half of the patients have disease recurrence after surgery and require systemic chemotherapy. Signi cant variations in the natural history and responses to treatment of patients with invasive bladder cancer are seen between tumors with identical features, re ecting the heterogeneity of the constituent tumor cells and the necessity of a personalized management approach. The assessment of tumor sensitivity to chemotherapeutic drugs is especially important and justi able for patients with higher risk of showing drug resistance. In this project this risk was evaluated through the expression of molecular markers, such as CD147, that have been associated with poor outcome and cisplatin resistance. With this project we aimed to establish an urothelial cancer xenograft model in nude mice from a sample of invasive urothelial carcinoma, characterize it, and assess the feasibility of this model for chemotherapy sensitivity and resistance testing. 1 of 9 specimens has grown as primary implant in nude mice and the xenograft generated was successfully transfered to other mice with a take rate of 2 in 3. Histologic and immunohistochemical (CD147,p53, p63, ki-67 and CK20) analysis showed that xenografts retain the morphology and phenotype of the original tumor, at least during xenograft establishment. These preliminary results supports the value of this model for drug testing, however future studies are required to validate the model and determine the pro le of the patients that may bene t for this approach.