Expressão da Caspase-3 activada no epitélio germinal de pacientes com azoospermia obstrutiva

Abstract

Sabe-se que na espermatogénese humana a apoptose é um mecanismo muito importante na regulação do equilíbrio entre as células de suporte (células de Sertoli) e as células germinativas ao longo do desenvolvimento, existindo também vários trabalhos que indicam um aumento das taxas de apoptose em situações de patologia testicular, como a privação hormonal, a rádioquimioterapia, as lesões obstrutivas (infecções, ausência congénita de canais excretores) e as lesões primárias do epitélio germinal (azoospermia secretora). Destes estudos, porém, nenhum utilizou métodos matematicamente correctos, pelo que os valores são muitas vezes contraditórios. Para resolver essa situação avaliamos por métodos estereológicos a presença de caspase-3 activa em biópsias testiculares de pacientes com espermatogénese conservada (controlos) e com azoospermia obstrutiva (casos). Os resultados demonstram que não existe um aumento global das taxas de apoptose na azoospermia obstrutiva. Na análise por tipo celular, os dados revelaram que na azoospermia obstrutiva as células de Sertoli e as células germinais diplóides são mais atingidas. Especificamente, as células de Sertoli apresentaram taxas superiores de apoptose do que qualquer tipo de célula germinativa, seguidas das espermatogónias, dos espermatócitos primários e dos espermatídeos redondos. Em conclusão, comparamos pela primeira vez, de modo quantitativo rigoroso por métodos estereológicos, as taxas de apoptose no epitélio germinal humano masculino na situação de azoospermia obstrutiva. Em relação aos controlos, os pacientes com azoospermia obstrutiva apresentam um maior atingimento das células germinais diplóides, sobretudo à custa dos espermatócitos primários.

ABSTRACT: It is known that apoptosis in human spermatogenesis is a very important mechanism for the regulation of the balance between the support cells (Sertoli cells) and germ cells throughout development. It is quoted in numerous articles that there is a rise in the rates of apoptosis in the presence of testicular pathology, as observed in hormonal deprivation, radio-chemotherapy, obstructive lesions (infections, congenital absence of excretory channels) and primary injuries of the germinal cell layer (secretory azoospermia). However, the reported studies have not used accurate mathematical methods, and so the results are many times contradictory. To solve this situation we used stereological methods to ascertain for the presence of active caspase-3 in testicular biopsies of patients with conserved spermatogenesis (controls) and obstructive azoospermia (cases). Data shows that overall apoptosis in obstructive azoospermia is not increased. Per cell type analysis results indicate that in obstructive azoospermia both Sertoli and diploid germ Cells are by fare more involved. Specifically, Sertoli cells show a higher degree of apoptosis than any other germ cell type, followed by spermatogonia, primary spermatocytes and round spermatids. In conclusion, we compared for the first time, with precise quantitative stereological methods the apoptosis rate in the human male germ cell layer with obstructive azoospermia. When compared to controls, cases with obstructive azoospermia show higher rates of diploid germ cell injury, essentially due to involvement of primary spermatocytes.