Implementação do método RAPID Enterobacteriaceae (BRD 07/21 – 11/13)

Abstract

A presente dissertação procede da realização da implementação do método RAPID’Enterobacteriaceae, validado pela AFNOR, para a contagem de Enterobactérias em diversas matrizes (humana, animal e ambiental), a partir de um estágio efetuado no laboratório de Microbiologia da ALS Portugal, em Castelo Branco. O laboratório encontra-se acreditado pela NP EN ISO/IEC 17025, garantindo a viabilidade das análises efetuadas. Na sociedade de consumo em que vivemos, cada vez mais, os laboratórios de controlo de qualidade precisam de dar uma resposta, em tempo record, aos seus clientes, mas também precisam de satisfazer as condições que o mercado exige, tendo em conta a vertente económica, ao mesmo tempo que são constrangidos a oferecer todas as garantias de segurança e compromisso para com a saúde pública. Face a estas exigências, a implementação de novos métodos torna-se crucial para elevar a capacidade de resposta de um laboratório. A implementação do método RAPID Enterobactericeae teve como suporte a norma ISO 16140-3. No processo de verificação da nova implementação no laboratório, foi necessário recorrer-se a duas etapas: a verificação da implementação e a verificação do item. Ambas as etapas se basearam na contagem de Enterobactérias, a partir da inoculação artificial de itens correspondentes a diferentes categorias. Para a verificação da implementação, que consiste no cálculo final do SIR, foi obtido um valor de 0,148 log10 ufc/g, considerando-se, deste modo, uma correta implementação, dado que o valor é inferior a 2xSR do estudo de validação do método pela AFNOR, parâmetro definido pelos critérios da ISO 16140-3. Do mesmo modo, na verificação do item, os critérios também foram cumpridos, dado que os valores obtidos através do cálculo do eBias, baseado nas diferenças absolutas dos valores entre os itens artificialmente contaminados e as suspensões inoculadas sem item, para todas as categorias, foram inferiores a 0,5 log10 ufc/g. Os resultados obtidos oferecem uma garantia para a acreditação do método no laboratório de microbiologia da ALS, de Castelo Branco.

This dissertation proceeds from the implementation of the RAPID’Enterobacteriaceae method, validated by AFNOR, for counting Enterobacteria in different matrices (human, animal and environmental), from an internship carried out in the Microbiology laboratory of ALS Portugal in Castelo Branco. The laboratory is accredited by NP EN ISO/IEC 17025, guaranteeing the viability of the analyzes carried out. In the consumer society we live in, quality control laboratories increasingly need to respond to their customers in record time, to fulfill the conditions required by the market, taking into account the economic aspect and, at the same time, are impelled to offer all guarantees of safety and commitment to public health. Given these requirements, the implementation of new methods is essential to increase the responsiveness of a laboratory. For the implementation of the RAPID’Enterobactericeae method, the ISO 16140-3 standard was used, where, in order to verify a new implementation in the laboratory, it was necessary to resort to two steps: verification of the implementation and verification of the item. Both stages were based on the Enterobacteriaceae count, from the artificial inoculation of items corresponding to different categories. To verify the implementation, which consists of the final calculation of the SIR, a value of 0.148 log10 cfu/g was obtained, thus considering a correct implementation, since the value is lower than the 2xSR of the method validation study by AFNOR, a parameter defined by the criteria of ISO 16140-3. In the verification of the item, the criteria were also fulfilled, since the values obtained through the calculation of the eBias, based on the absolute differences of the values between the artificially contaminated items and the suspensions inoculated without item, for all categories, were lower than 0.5 log10 cfu/g. The results obtained provide a guarantee for the accreditation of the method in the microbiology laboratory of ALS in Castelo Branco.