Perfis genéticos: transferências, persistências e misturas de DNA no background laboratorial

Abstract

Atualmente é comum determinarem-se perfis genéticos a partir de amostras com quantidades reduzidas de DNA, devido ao grande avanço que a ciência e a tecnologia têm sofrido nas últimas décadas. Isto significa que um maior número de amostras podem ser caraterizadas geneticamente, nomeadamente amostras de trace DNA, nas quais não se sabe a origem do material biológico. Esta realidade traz precauções adicionais na interpretação dos perfis genéticos, visto que podem ocorrer transferências, persistências e misturas de DNA, que geram contaminação e mascaram os resultados obtidos. A contaminação num cenário forense pode acontecer de muitas formas diferentes e via diferentes vetores, sendo talvez o mais preocupante a persistência de background DNA nos laboratórios forenses. Logo, é essencial ter medidas de mitigação da contaminação em laboratório e estratégias de monitorização da contaminação. Assim, este trabalho tem como objetivos avaliar a taxa de contaminação no SGBF-C, perceber quais as fontes da contaminação e como minimizá-la e, se possível, eliminá-la. Para tal, fez-se colheita de amostras de trace DNA em diversos locais do SGBF-C, extraiu-se e quantificou-se o seu DNA e fez-se o perfil genético das amostras que revelaram contaminação. Por fim, foi feita uma descontaminação. Segundo os resultados da quantificação, foram detetados níveis de background DNA reveladores de contaminação em 12,5 % dos locais amostrados. A localização desta contaminação demonstrou a existência de maior cuidado com a descontaminação e prevenção da contaminação dos locais onde existe manipulação direta das amostras. Os perfis obtidos para as amostras dos locais contaminados mostraram que a principal fonte de background DNA do laboratório são os colaboradores do Serviço, embora não seja possível atribuir inequivocamente o mecanismo de transferência do DNA contaminante. A descontaminação dos locais contaminados permitiu perceber que a realização de uma descontaminação apropriada impede a persistência do DNA e é eficaz na eliminação da contaminação. Portanto, as medidas de prevenção da contaminação aplicadas no SGBF-C são adequadas para a minimização, e possível eliminação, da contaminação laboratorial, mas é necessário que sejam todas respeitadas e executadas corretamente para serem eficazes. Para se chegar a uma atribuição evidente das fontes da contaminação laboratorial e melhores estratégias de eliminação da contaminação são necessários estudos futuros.

Currently, it is common to determine genetic profiles from samples with reduced amounts of DNA, due to the great advances that science and technology have experienced in recent decades. This means that a greater number of samples can be genetically characterized, in particular trace DNA samples, in which the origin of the biological material is unknown. This reality raises additional precautions in the interpretation of genetic profiles, given that the occurrence of transfers, persistence and mixtures of DNA can generate contamination and mask the results obtained. Contamination in a forensic setting can happen in many different ways and via different vectors, perhaps the most worrisome being the persistence of background DNA in forensic laboratories. Therefore, it is essential to have contamination mitigation measures in the laboratory and contamination monitoring strategies. Thus, this work aims to evaluate the contamination rate in SGBF-C, identify the sources of contamination and how to minimize the contamination and, if possible, eliminate it. In this way, trace DNA samples were collected from several locations in the SGBF-C, their DNA was extracted and quantified, and the samples that revealed contamination were profiled. Lastly, a decontamination was performed. According to the quantification results, background DNA levels revealing contamination were detected in 12.5% of the sampled sites. The location of this contamination demonstrated the existence of greater concern with decontamination and prevention of contamination in places where there is direct handling of samples. The profiles obtained for the samples from the contaminated sites showed that the main source of background DNA in the laboratory are the employees of the Service, although it is not possible to clearly attribute the mechanism by which the contaminating DNA was transferred. Decontamination of contaminated sites allowed the realization that carrying out an appropriate decontamination prevents DNA persistence and is effective in eliminating contamination. Therefore, the contamination prevention measures applied in the SGBF-C are adequate for the minimization, and possible elimination, of laboratory contamination, but it is necessary to respect and correctly execute them all for them to be effective. In order to reach a clear attribution of the sources of laboratory contamination and better contamination elimination strategies, further studies are needed.