Frequency and functional activity of Vδ1 T cells in chronic lymphocytic leukaemia and in monocional B cell lymphocytosis

Abstract

A leucemia linfocítica crónica (LLC) é uma doença linfoproliferativa crónica de células B caracterizada pela proliferação descontrolada de linfócitos B patológicos. É uma doença de curso geralmente indolente, mas que pode em alguns casos progredir rapidamente e necessitar de tratamento. Com vista a melhorar o prognóstico destes doentes, imunoterapias baseadas em células T têm vindo a ser desenvolvidas, com especial interesse numa subpopulação minoritária dos linfócitos T: células T γδ. Estas células representam, normalmente, menos de 10% dos linfócitos T circulantes, apresentando características distintas dos linfócitos αβ, o que lhes confere vantagem quando selecionadas para terapia celular. Dentro deste grupo de células, os linfócitos T Vδ1 parecem exibir atividade citotóxica contra células B de LLC, e como tal podem vir a ser utilizadas em protocolos de imunoterapia anti-tumoral. No entanto, o comportamento destas células in vivo é francamente desconhecido tanto em situações de normalidade, como de doença. O objetivo deste projeto foi estudar a frequência das células Vδ1 em sangue periférico e avaliar, através de estudos imunofenotípicos, a sua atividade efetora e citotóxica (expressão de CD27, CD69 e granzima B) em casos de LLC, de linfocitoses B monoclonais (LBM) e num grupo controlo. Os resultados mostraram uma expansão do compartimento efetor em todas as subpopulações de linfócitos T, particularmente nas células TCD8+ e nas células T Vδ1, o que se correlacionou com um aumento destas células a expressar granzima B desde o grupo controlo até ao grupo de LLC com estádio mais avançado da doença. A percentagem de células a expressar o marcador de ativação CD69 foi marcadamente mais alta nas células T Vδ1, mas no grupo controlo. Assim, os resultados obtidos sugerem que as células TVδ1 parecem apresentar um fenótipo efetor citotóxico, com características semelhantes às células TCD8+ e restantes subpopulações de células T γδ, o que parece evidenciar que conjuntamente com outras células, as células TVδ1 podem contribuir para uma atividade na resposta antitumoral contra células B de LLC.

Chronic lymphocytic leukaemia (CLL) is a B-cell chronic lymphoproliferative disease characterized by an uncontrolled proliferation of pathological B lymphocytes. This disease is normally of indolent progression, but it may, in some cases, progress rapidly and require treatment. In order to improve the prognosis of these patients, T-cell based immunotherapies have been developed, with special interest in a minor subpopulation of T lymphocytes: γδ T cells. These cells represent, normally, less than 10% of circulating T lymphocytes and exhibit distinct characteristics comparing to αβ T lymphocytes providing them with advantages when selected for T cell therapy. Within this group, Vδ1 T lymphocytes seem to display cytotoxic activity against B cells from CLL, conferring to these cells the ability to be used in antitumoral immunotherapies. However, the behaviour of these cells in vivo is frankly unknown in both normal and disease situations. The objective of this project was to study the frequency of Vδ1 T cells on peripheral blood and to evaluate, through immunophenotypic studies, their effector and cytotoxic activity (expression of CD27, CD69 and granzyme B) in CLL, monoclonal B cell lymphocytosis (MBL) and controls. Our results disclosed an expansion of effector compartment in all subpopulations of T lymphocytes, particularly for CD8+ T cells and Vδ1 T cells, which correlated with an increase in these cells expressing granzyme B from control group to advanced stages of CLL. CD69 expression was markedly higher in Vδ1 T cells, in the control group. In conclusion, the results obtained suggest that Vδ1 T cells appear to present an effector cytotoxic phenotype, with similar characteristics to CD8 + T cells and the remaining γδ T cells, which might point to a contribution to an antitumor response against CLL cells, mediated by the interplay between these cells.