Estudo lipidómico de plasma sanguíneo para detecção de doenças da grávida e do feto

Abstract

Os lípidos desempenham funções cruciais na estrutura e sinalização dos sistemas biológicos; deste modo a caracterização do seu perfil e avaliação da sua variação em diferentes condições fisiológicas, tem vindo a suscitar interesse, resultando no surgimento da lipidómica. O presente trabalho propôs-se a executar um estudo lipidómico de plasma sanguíneo da grávida para deteção de Trissomia 21, para uma possível aplicação em clínica, como método alternativo, devido às características invasivas dos métodos atuais. Assim sendo o objetivo consistiu no estudo de alterações no perfil lipídico no plasma sanguíneo de grávidas com filhos com Trissomia 21 comparativamente a grávidas com bebes normais, nos1º e 2º Trimestres de gravidez. O perfil lipídico foi analisado usando MALDI-MS, ESI-MS e LC-MS. As amostras aplicadas em MALDI-MS e ESI-MS foram previamente extraídas por MTBE; por sua vez as amostras submetidas a LC-MS foram extraídas por SPE, obtendo-se um extrato lipídico total e de fosfolípidos, respetivamente. Os resultados de LC-MS foram analisados por análise univariada. Por MALDI-MS não foi possível comparar os resultados de controlo com patologia pela ausência de reprodutibilidade observada, Por sua vez ESI-MS demonstrou ultrapassar este ponto, permitindo ainda a identificação dos iões observados. Por LC-MS foram possíveis de observar 4 PC com alterações estatisticamente significativas, sendo elas PC(32:2); PC(34:4); PCp(36:5) e PC(36:6), de m/z 730.5; 754.6; 766.6 e 778.5, podendo tal alteração estar associada à suscetibilidade dos individuos portadores da patologia aos efeitos do stress

Lipids are crucial to the structure and signalization, therefore its fingerprint and variations in different physiological conditions have evoke an interest, culminating in the birth of lipidomics.The present study seeks to apply a lipidomic approach to detection of Trisomy 21 in blood plasma from pregnant woman, to a possible application to a prenatal setting due to the actual invasive methods. The aim of the study was to identify alterations on the blood plasma lipid fingerprint for Trisomy 21, in comparison to controls, for 1st and 2 trimesters of pregnancy. Its fingerprint was analised by MALDI-MS, ESI-MS and LC-MS. The samples applied on MALDI-MS and ESI-MS were previously extracted by MTBE, while the ones used for LC-MS were extracted by SPE, acquiring a total lipid extract and a phospholipid extract, respectively. LC-MS results were applied to univariate analysis. By MALDI-MS the comparison between controls and pathology was not possible due to the lack of reproducibility. ESI-MS allowed to surpass this point, and also identify the several ions observed. By LC-MS we were able to observe 4 PC statistically significate: PC(32:2); PC(34:4); PCp(36:5) e PC(36:6), de m/z 730.5; 754.6; 766.6 e 778.5. This alterations could be due to the susceptibility of the individuals to oxidative stress’ effects.