Estudo funcional das células T de gânglio normal/reativo e com doença linfoproliferativa crónica de células B

Abstract

As doenças linfoproliferativas crónicas de células B são um grupo heterogéneo de entidades que representam cerca de 80-90% de todas as síndromes linfoproliferativas crónicas, nas quais podem ser observadas uma proliferação clonal de linfócitos B. Amostras de biópsia de gânglio linfático podem ser usadas para o diagnóstico destas doenças. Os gânglios linfáticos são o local adequado para as interações entre as células B e as células T e para ocorrer uma resposta imune. Neste sentido, é esperado que, na presença de células B malignas, com uma capacidade diferente para interagir com as células T, estas irão responder de uma forma diferente. O objetivo do presente trabalho consistiu na análise numérica e funcional das células T, nomeadamente de células T ativadas, células T reguladoras, Th/c17 e Thc/1, bem como, das células NK e quantificação de monócitos e células dendríticas. Foram analisadas dezanove amostras de biópsia de gânglio linfático, sete normais/reativas, cinco com linfoma linfocítico/LLC-B e sete com linfomas Não- Hodgkin B. Quantificou-se as subpopulações de células T CD4 e CD8; Th/c17; Th/c1; Tregs; células T ativadas através da citometria de fluxo, e após purificação das células TCD4 e TCD8, procedeu-se à quantificação da expressão de mRNA para os genes IL2 e IL10. Os nossos resultados mostraram um aumento das células Treg bem como, um decréscimo das células Th/c17 e Th/c1 no grupo com linfomas linfocíticos/LLC-B e no grupo com LNH-B. Relativamente à expressão génica, verificou-se uma diminuição de IL2 e um aumento de IL10 tanto para as células T CD4, como para as células T CD8 no grupo com linfomas linfocíticos/LLC-B e no grupo com LNH-B. Os resultados, embora preliminares, devido ao reduzido números de amostras estudadas, apontam para alterações significativas fenotípicas e funcionais nas células T e NK dos gânglios linfáticos com infiltração por células B patológicas, o que sugere diferenças ao nível da resposta imune anti-tumoral, que podem contribuir para o prognóstico destas entidades.

B cells Chronic lymphoproliferative diseases are a heterogeneous group of entities representing about 80-90% of all chronic lymphoproliferative syndromes, in which can be observed a clonal proliferation of B lymphocytes. Lymph node biopsy samples may be used to diagnosis of these diseases. Lymph nodes are suitable location for the interaction between B cells and T cells and an immune response to occur. Therefore, it is expected that in the presence of malignant B cells with a different capacity to interact with T cells, they will respond in a different way. The objective of this study was to numerical and functional analysis of T cells, particularly of activated T cells, regulatory T cells, Th/c17 and Th/c 1, as well as quantitation of NK cells and monocytes and dendritic cells. Nineteen lymph node biopsy samples were analyzed, seven normal/reactive, five with lymphocytic lymphoma/CLL-B and seven non- Hodgkin's lymphomas. Subpopulations of CD4 and CD8 T cells; Th/c17; Th/c1 Tregs; and T cells activated by flow cytometry were quantitated. After purification of CD4 and CD8 T cells, we proceeded to quantify the expression of mRNA for IL-2 and IL-10 genes. Our results showed an increase of Treg cells as well as a decrease in Th/ c17 cells and Th/c1 in the group with lymphocytic lymphoma/B-CLL and NHL-B group. For the gene expression, there was a decrease in IL2 and an increase of IL10 both CD4 T cells, as for CD8 T cells in the group with lymphocytic lymphomas/B-CLL and NHL-B group. The results, although preliminary, due to the small number of samples analyzed, indicate phenotypic and functional significant changes in the T and NK cells from lymph nodes with infiltration by pathological B-cells, suggesting differences in anti-tumor immune response, which may contribute to the prognosis of these entities.