Terameprocol effect in the proliferation and apoptosis of SMCs in PAH

Abstract

A hipertensão arterial pulmonar (HAP) é uma doença rara e letal, caracterizada pela remodelação da vasculatura pulmonar, devido a uma proliferação celular excessiva e diminuição da apoptose. Estas alterações levam ao aumento da resistência e pressão arterial pulmonares, culminando em insuficiência cardíaca direita. O tratamento atual é limitado, não oferecendo uma cura e, portanto, é necessária mais investigação para encontrar novos alvos terapêuticos. Neste contexto, a via da survivina, uma molécula que inibe a apoptose e promove a proliferação e cujos níveis estão aumentados na HAP, parece promissora. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do terameprocol, um antagonista da survivina, na proliferação e apoptose de células musculares lisas na HAP. Foi utilizado o modelo experimental de HAP induzida por monocrotalina (MCT). Ratos Wistar foram injetados com MCT (60 mg/kg, sc) para a indução da doença e, após 21 dias foram sacrificados, o coração e os pulmões foram removidos e a artéria pulmonar do lobo superior esquerdo foi dissecada. A adventícia e íntima foram removidas da artéria e as células musculares lisas da média foram isoladas através de um método enzimático. Foi realizada uma cultura primária de células musculares lisas que foram tratadas com diferentes concentrações de terameprocol. Em seguida, foram realizados ensaios para avaliar a apoptose (TUNEL) e proliferação (BrdU e exclusão por trypan blue) das células musculares lisas. Os resultados mostraram que o terameprocol inibe a proliferação e induz a apoptose das células musculares lisas da artéria pulmonar de ratos com HAP induzida pela MCT, sugerindo que a via da survivina pode constituir um novo alvo terapêutico a ser investigado na HAP.

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a rare and lethal disease, characterized by remodeling of the pulmonary vasculature due to excessive cellular proliferation and decreased apoptosis. These alterations lead to increased pulmonary arterial resistance and pressure, culminating in right heart failure. The current treatment is limited, not affording a cure and thus, more research is needed to find new therapeutic targets. In this context, targeting survivin, a molecule that inhibits apoptosis and promotes proliferation and reported to be increased in PAH, seems promising. The aim of this work was to evaluate the effect of terameprocol, an antagonist of survivin, in the proliferation and apoptosis of smooth muscle cells in PAH. We used the experimental model of PAH induced by monocrotaline (MCT). Wistar rats were injected with MCT (60 mg/kg, sc) to induce the disease and after 21 days, they were euthanized, their heart and lungs were removed and the pulmonary artery from the left upper lobe was dissected. The adventitia and intima were removed from the artery and the smooth muscle cells from the media were isolated through an enzymatic method. The resultant primary cultures of smooth muscle cells were treated with different concentrations of terameprocol. Then, assays were performed to evaluate smooth muscle cell apoptosis (TUNEL assay) and proliferation (BrdU and trypan blue exclusion assays). The results showed that terameprocol inhibits proliferation and promotes apoptosis of pulmonary artery smooth muscle cells from rats with MCT-induced PAH, suggesting that survivin pathway can be seen as a new therapeutic target to be explored in PAH.