Real-Time PCR, High Resolution Melting - aplicações forenses

Abstract

Apontada como a maior revolução científica na área forense desde a descoberta das impressões digitais, a identificação humana por meio da análise do DNA tornou-se uma poderosa ferramenta de investigação, auxiliando na elucidação de casos forenses, baseando-se cientificamente na existência de polimorfismos genéticos ao longo do genoma em indivíduos diferentes, que faz com que cada pessoa possua um código genético único. Com a introdução da real-time PCR nas investigações forenses, tornou-se possível uma análise sensível e específica de regiões polimórficas tanto no genoma nuclear como no mitocondrial, a partir de quantidades ínfimas de DNA obtidas de amostras altamente degradadas ou com baixo número de cópias. A quantificação do DNA é um procedimento importante na análise forense e deve ser efetuado, previamente, a qualquer análise de DNA. A união entre a bioinformática e a genética forense propiciou a criação de métodos de análise específicos, como a HRM, muito útil na genotipagem de SNPs, de extrema importância na investigação forense. Foi elaborada uma revisão bibliográfica com o objetivo de conhecer as aplicações forenses da real-time PCR e os respetivos métodos, tendo se confirmado então a aplicabilidade deste método na área forense.

Listed as the greatest revolution in forensic science since the discovery of fingerprints, identification by analyzing human DNA has become a powerful research tool, helping to elucidate forensic cases, scientifically based on the existence of genetic polymorphisms throughout the genome at different individuals, which causes that each person has a unique genetic code. With the introduction of real-time PCR in forensic investigations, it became possible a sensitive and specific analysis of polymorphic regions both in the mitochondrial and nuclear genome, from minute quantities of DNA obtained from samples highly degraded or low copy number. The quantification of DNA is an important procedure in forensic analysis and must be made in advance to any DNA analysis. The union between forensic genetics and bioinformatics led to the creation of specific analysis methods, such as HRM, very useful in scanning and genotyping of SNPs, of utmost importance in forensic investigation. A literature review has been prepared in order to meet the forensic applications of real-time PCR and related methods, and so been confirmed the applicability of this method in the forensic field.