Fosforilação da HsPI3-Kinase-C2α = Phosphorylation of HsPI3-Kinase-C2α

Abstract

Várias isoformas da enzima fosfoinositide-3-cinase (PI3-Cinase), uma vasta família de cinases lipidicas têm nos últimos anos vindo a ser clonada e caracterizada. P13-Cinases constituem uma família de cinases conservadas durante a evolução que catalisam a adição de uma molécula de fosfato ao fosfatidilinositol e seus derivados, esta adição tem lugar no anel inositol na posição D3. P13-Cinases estão agrupadas em três classes de acordo com as moléculas que preferencialmente utilizam como substrato in vitro e de acordo com as suas características estruturais. Fosfoinositide-3-Cinase-C2α (PI3-Cinase-C2α), pertence à classe I1 de P13- Cinases, esta classe é caracterizada pela utilização de fosfatidilinositol e fosfatidilinositol-4-P como substrato in vitro. Todos os membros da classes I1 possuem no seu C-terminal um domínio C2, característico da classe. Este trabalho permitiu a identificação do local de fosforilação da HsPI3-Cinase- C2α bem como a identificação de duas cinases envolvidas na sua fosforilação. A fosforilação de HsP13-Kinase-C2α ocorre na Ser259 e este resíduo é um alvo comum de fosforilação mitótica e de fosforilação induzida por radiação UV. Durante o ciclo celular HsP13-Cinase-C2α é predominantemente fosforilada na M fase e a cinase envolvida 6 a Cdk1,após radiação UV a fosforilação é mediada pela JNK.

In recent years, a large family of Phosphoinositide-3-Kinases (PI3-Kinase) isozymes has been characterized and cloned. PI3-Kinases constitute a family of evolutionary conserved lipid kinases that catalyse the addition of a phosphate molecule to the D3 position of the inositol ring of phosphatidylinositol and its derivatives. P13-Kinases are grouped into three classes according to the molecules that they preferentially utilize as substrates and their structural characteristics. Phosphoinositide-3-Kinase-C2α (P13-Kinase-C2α) belongs to class II P13- Kinases, which are defined by their in vitro use of phosphatidylinositol and phosphatidylinositol-4-phosphate as substrates. All type II P13-Kinases contain a C2 domain at their C-terminus. This work resulted in the identification of a phosphorylation site on HsP13- Kinase-C2α as well the identification of two kinases involved in mitotic and UVinduced phosphorylation of HsP13-Kinase-C2α. The phosphorylation of HsP13- Kinase-C2α occurs in Ser259 and this serine is a common target in mitotic and UV-induced phosphorylation. We found that during the cell cycle HsP13- Kinase-C2α is predominantly phosphorylated in mitotic phase and the kinase involved is Cdkl and after UV irradiation the phosphorylation of HsPI3-Kinase- C2α is mediated by JNK.